非無菌產品微生物限度檢查怎么做,微生物限度儀廠家告訴您,下面小編就來詳細介紹一下。
非無菌產品微生物限度檢查的步驟如下:
1. 準備所需工具和培養(yǎng)基,如平皿、胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基等。
2. 選擇適當的方法制備供試液,例如傾注法或涂布法。傾注法是將供試液1ml置直徑90mm的無菌平皿中,注入15~20ml溫度不超過45℃的胰酪大豆胨瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基,混勻,凝固,倒置培養(yǎng)。涂布法則取適量溫度不超過45℃的胰酪大豆胨瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基,注入直徑90mm的無菌平皿,凝固,制成平板,然后每平板表面接種供試液不少于0.1ml。
3. 在每個平皿中制備兩個平皿,以算術平均值作為計數結果。
4. 根據表1規(guī)定條件培養(yǎng)、計數,并測定供試品對照組及菌液對照組菌數。
5. 計算各試驗組的平均菌落數。
6. 按照每株試驗菌每種培養(yǎng)基至少制備一個平皿的要求進行試驗,計數后與標準對比以確定結果是否符合要求。
若要使用薄膜過濾法進行檢查,應按以下步驟操作:
1. 選用孔徑不大于0.45μm的濾膜,直徑一般為50mm。
2. 供試品及其溶劑應不影響濾膜材質對微生物的截留。
3. 水溶性供試液過濾前先將少量的沖洗液過濾以潤濕濾膜。油類供試品則應在使用前充分干燥。
4. 供試液經薄膜過濾后,若需要用沖洗液沖洗濾膜,每張濾膜每次沖洗量一般為100ml。總沖洗量一般不超過500ml,最多不得超過1000ml。
5. 取適量供試液(一般取相當于1g、1ml或10cm2的供試品),加至適量的稀釋液中,混勻,過濾。用適量的沖洗液沖洗濾膜。
6. 若測定需氧菌總數,轉移濾膜菌面朝上貼于胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板上;若測定霉菌和酵母總數,轉移濾膜菌面朝上貼于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上。按表1規(guī)定條件培養(yǎng)、計數。
7. 每株試驗菌每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。同法測定供試品對照組及菌液對照組菌數。
如果需要使用MPN法,應按以下步驟進行:
1. 取至少3個連續(xù)稀釋級的供試液,每一稀釋級取3份1ml分別接種至3管裝有9~10ml胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中,同法測定菌液對照組菌數。
2. 必要時可在培養(yǎng)基中加入表面活性劑、中和劑或滅活劑。
3. 接種管置30~35℃培養(yǎng)不超過3天,逐日觀察各管微生物生長情況。
4. 如果由于供試品的原因使得結果難以判斷,可將該管培養(yǎng)物轉種至胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基或胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基,在相同條件下培養(yǎng)1~2天,觀察是否有微生物生長。
5. 根據微生物生長的管數查被測供試品1g、1ml或10cm2中需氧菌總數的最可能數。
在完成上述步驟后,根據結果判斷是否符合要求。如果計數方法適用性試驗中試驗組菌落數減去供試品對照組菌落數的值與菌液對照組菌落數的比值在0.5~2范圍內或試驗組菌數在菌液對照組菌數的95%置信限內,則可認為檢查結果符合要求。如果各試驗菌的回收試驗均符合要求,則可按照所用的供試液制備方法及計數方法進行該供試品的需氧菌總數、霉菌和酵母菌總數計數。如果方法適用性確認時還存在一株或多株試驗菌的回收達不到要求,則應選擇回收最接近要求的方法和試驗條件進行供試品的檢查。