微孔濾膜過濾法(又稱膜過濾法)是指采用一定孔徑等級(jí)的無菌孔濾膜截留流體里的微生物,然后轉(zhuǎn)移至合適的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)及菌落計(jì)數(shù)。該過程常被應(yīng)用于微生物限度檢測(cè)和無菌檢測(cè)。與傳統(tǒng)平皿涂布法相比,薄膜過濾法具有不受樣品體積限制、可洗去抑制物、高靈敏度等優(yōu)點(diǎn)。下面一文告訴您微生物檢測(cè)之膜過濾法的操作步驟。
1.微生物限度過濾器座用75%酒精棉球擦拭,再用火槍灼燒至少1min。用火槍灼燒過濾座的中心、外邊緣、下邊緣。
2.鑷子浸泡在2CM高的95%乙醇里,待過濾器座冷卻至室溫;用火焰灼燒鑷子,冷卻4、5秒后夾取濾膜
3.放在濾座上,扣上無菌過濾杯;為了盡量減少膜面受損,鉗子夾持濾膜時(shí),只許夾濾膜邊緣。
4.用100ml左右的無菌水沖洗瓶胚、瓶、罐、蓋,將樣品或其沖洗水加到過濾杯中。在旋開瓶蓋之前,應(yīng)對(duì)瓶子再次進(jìn)行振搖,并且只能在過濾臺(tái)面以下進(jìn)行振搖,以免污染濾杯和濾膜。
5.取下過濾杯,用火焰燃燒過的鑷子夾住濾膜邊緣。稍稍打開培養(yǎng)皿的蓋子,放薄膜至吸收墊,蓋上蓋子。用吸水紙吸去過濾座的水珠,再用火槍灼燒過濾器座至少1min,重復(fù)操作。所有樣品測(cè)試完成后,用大量無菌水沖洗過濾,設(shè)備,抽濾去殘留的水。75%酒精浸泡抽濾系統(tǒng),灼燒過濾器座,使其表面保持干燥清潔。
膜過濾法的操作步驟可能因具體的應(yīng)用和實(shí)驗(yàn)條件而有所不同,因此在進(jìn)行微生物檢測(cè)時(shí),應(yīng)參考相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和操作規(guī)程,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。同時(shí),實(shí)驗(yàn)過程中需嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的安全規(guī)定,確保操作人員的安全。